信号转导和转录活化因子3和碱性螺旋—环—螺旋转录因子1在卵巢恶性上皮肿瘤中的表达(2)
1 资料与方法1.1 一般资料
收集武汉大学人民医院2015年3月~2016年12月卵巢上皮癌标本49例、卵巢良性肿瘤14例进行研究,术后均经病理证实。患者均为女性,年龄42~76岁,平均(63.4±5.2)岁。术前均未接受过化疗、放疗或免疫等抗肿瘤治疗。FIGO分期:Ⅰ期13例,Ⅱ期22例,Ⅲ期9例,Ⅳ期5例。经医院伦理委员会批准,充分告知参与者实验相关事项并取得知情同意。
1.2 材料和试剂
所有组织样本均选取部分于4%甲醛溶液固定24 h后石蜡包埋,剩余部分于-70℃储存,用于组织蛋白的提取。二氨基联苯胺(DAB)显色剂和S-P试剂盒购自福州迈新生物技术开发有限公司;抗体STAT3和抗体Twist1分别购自美国CST公司和Abcam公司。
1.3 方法
免疫組化染色采用链霉亲和素-生物素复合物技术法(S-P法)。主要操作步骤:常规行组织标本脱蜡、水化、抗原修复、阻断、封闭,一抗4℃孵育过夜,二抗室温孵育1 h,DAB显色。苏木精复染,脱水、透明、封片,于正置显微镜下选择400倍视野,每张免疫组化片上随机选择5个视野,每个视野拍摄5幅照片。
1.4 评价标准
免疫组化结果判定:免疫组化结果采用半定量判定分析[5] ......
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