DAPT对骨肉瘤U2OS细胞增殖和凋亡影响的实验研究(1)
[摘要] 目的 观察γ-分泌酶抑制剂DAPT对人骨肉瘤细胞系U2OS增殖和凋亡的影响,探讨DAPT抑制骨肉瘤增殖并诱导其凋亡的可能机制。 方法 采用体外培养人成骨肉瘤细胞系U2OS,CCK-8法检测不同浓度DAPT对成骨肉瘤细胞系U2OS生长的抑制作用;Annexin V-FITC/PI双标染色,流式细胞仪检测细胞凋亡率;Hoechst 33258染色,倒置荧光显微镜下观察细胞凋亡的形态学变化;应用RT-PCR和Western blot法检测DAPT对凋亡通路相关mRNA和蛋白表达的影响;采用Caspase活性检测试剂盒检测Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9的活性变化。 结果 CCK-8检测显示5~50 μmol/L的DAPT可抑制人骨肉瘤U2OS细胞增殖并具有时间和剂量依赖性;流式细胞术检测显示5、10、20 μmol/L的DAPT可明显诱导骨肉瘤U2OS细胞发生凋亡 ......
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