焦磷酸测序检测CYP2C19基因多态性方法的建立(2)
1 对象与方法1.1 对象
选择2016年12月~2017年3月贵州省人民医院健康体检成人50名,其中男21名,女29名,平均年龄为(35.7±9.7)岁。
1.2 主要仪器与试剂
NP968核酸自动提取仪(西安天隆科技有限公司);美国ABI Veriti96 PCR仪(美国ABI生物系统公司);Qiagen PyroMark Q24焦磷酸测序仪(德国凯杰公司);PCR擴增引物和焦磷酸测序引物(上海生工生物有限公司)。
1.3 方法
1.3.1 基因组DNA的提取 根据天隆NP968核酸自动提取仪的说明书进行全血DNA提取,对DNA样本进行浓度和纯度检测,置于-20℃保存备用。
1.3.2 CYP2C19多态性位点的引物设计 在NCBI上分别下载CYP2C19*2(681G>A)、CYP2C19*3(636G>A)和CYP2C19*17(-806C>T)3个单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism ......
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