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编号:13212158
LOXP—DsRed—LOXP系统的构建及其应用(3)
http://www.100md.com 2017年11月25日 中国医药导报 2017年第33期
     1.2.4 裸鼠结肠癌细胞原位移植模型构建 将SPF级4周龄雄性Balb/c裸鼠20只随机分为两组(n=10),适应1周后行结直肠黏膜下肿瘤细胞注射。MCA38Cre-Luciferase细胞与MCA38Luciferase细胞消化离心后制成单细胞悬液,计数后取适量细胞用PBS悬浮,通过小鼠结肠镜行结直肠黏膜下注射。第一组每只接种2×106个MCA38Cre-Luciferase细胞,第二组每只接种2×106个MCA38Luciferase细胞,注射体积均为15 μL。2周后行小鼠活体成像及肠镜检测成瘤情况,同时取灌肠液检测Cre酶活性及表达情况。

    1.2.5 LOXP-DsRed-LOXP系统体外Cre酶活性检测 检测前1 d传代MCA38LOXP-DsRed-LOXP与MCA38DsRed至十二孔板,使其细胞密度在60%~80%。检测前去除细胞上清,更换为含6 μg/mL polybrene的完全培养基 ......
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