1.2 方法

    1.2.1 主要仪器与试剂 TIANamp Blood DNA Kit(天根生物技术公司)，GJB2基因检测试剂盒(荧光PCR法)(济南英盛生物技术有限公司)，ABI 9700 PCR扩增仪。

    1.2.2 基因提取 采集受检者3～5 mL外周静脉血(空腹)，血液放入EDTA抗凝剂的真空采血管，统一编号。应用TIANamp Blood DNA Kit分离全基因组DNA，按试剂盒说明书操作，分光光度法检测DNA浓度和纯度，DNA浓度在1～300 ng/μL范围内，纯度(A260/A280)在1.7～1.9为合格。

    1.2.3 基因检测 采用GJB2基因检测试剂盒探针特异性PCR技术，按照GJB2基因的4个常见突变位点(235delC、299-300delAT、176del16bp、512insAACG)的突变序列来设计高度特异的双标记荧光TaqMan探针，通过在ABI 9700 PCR仪上进行PCR扩增，与模板DNA结合，收集荧光信号，累积曲线，实时读取定性结果，判读是否存在相关基因位点的突变。PCR反应条件见图1 ......