SERPINE2基因rs3795987位点基因多态性与新疆汉族、维吾尔族慢性阻塞性肺疾病的相关性研究(2)
1.2 仪器与试剂Veriti 96well PCR仪、3730xl测序仪均系美国ABI公司生产;引物、Pfu DNA Polymerase高温聚合酶、DNA提取采用的SK8224试剂盒等均由生工生物工程(上海)股份有限公司提供。
1.3 基因组DNA的提取
受试者均采取3 mL外周静脉血,血样用EDTA抗凝,-80℃的冰箱中保存备用,按照美国Omega公司E.Z.N.A.SE Blood DNA试剂盒说明书方法提取DNA,将提取后的DNA置于-80℃冰箱保存备用。
1.4 目的DAN片段的聚合酶链式反应(PCR)
1.4.1 引物的设计 引物由生工生物工程(上海)股份有限公司提供,探针由美国ABI公司提供。rs3795987上游引物为:5′-TTGAAGTGCCTTTTGTTAC-3′,下游产物为:5′-TTGAACCCTGGAGTCTAAC-3′,片段长度为194 bp。
1.4.2 目的基因片段PCR扩增 PCR反应体系的总体积为25 μL ......
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