1.3 实验方法

    实验前2 d采用戊巴比妥钠(80 mg/kg)经腹腔注射麻醉，刮除其背部毛发，形成约2 cm×2 cm大小的暴露区域，单笼饲养2 d后，取小鼠背部正中全层皮肤，约1 cm×1 cm大小。观察组使用质量控制后的病理切片，对照组使用传统的病理切片。将两组免疫组化病理切片进行显微镜下观察比较，并将观察组和对照组的病理资料进行统计分析，找出日常工作中容易出现的常见问题，并详细制订解决的方法，比较观察组和对照组的制片质量及诊断价值。其中每组5只进行PCNA染色，5只进行CD3染色，具体如下：

    对照组：按照科室传承经验方式进行操作。①取材后福尔马林固定12～24 h，常规脱水、透明、浸蜡、包埋；②常规切片；③石蜡切片烘烤30 min后常规二甲苯脱蜡至水，蒸馏水清洗1次；④PBS清洗1 min，玻片组织上滴加PCNA、CD3的单克隆Ⅰ抗，4℃孵育过夜；⑤次日PBS洗涤3次，每次1 mim后，滴加相应Ⅱ抗，37℃孵育1 h；⑥配制新鲜DAB显色液，玻片由PBS洗涤3次，每次3 mim，经DAB分别染色1、3 min后终止显色；⑦显微镜下观察免疫组化染色结果并拍照记录。石蜡切片烤片时间短 ......