156株耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌临床分布特点及其药物敏感性检测(2)
1 材料与方法1.1 菌株来源及其药物敏感性试验
收集我院2014年1月~2017年7月临床科室送检病原学检查标本,按照《全国临床检验操作规程》要求进行标本接种和病原菌分离,应用Phoenix 100全自动微生物鉴定药敏系统进行鉴定及其药敏试验。收集CRKP菌株(亚胺培南、美罗培南任1耐药肺炎克雷伯菌)于-80℃冰箱保存。部分药敏试验采用K-B法检测,抗菌药物纸片为英国Oxoid公司生产。多黏菌素、替加环素药敏结果根据欧洲抗菌药物敏感性试验委员会(EUCAST)标准进行判读,其他抗菌药物药敏试验结果判断参照美国临床与实验室标准化协会(CLSI)2016年M100-26标准。
1.2 碳青霉烯酶检测
采用改良Hodge试验(modified Hodge test,MHT),将大肠埃希菌ATCC 25922 0.5麦氏浊度菌悬液用无菌生理盐水1∶10稀释,均匀涂布于MH平板上,室温干燥3~10 min后,中间贴美洛培南,用待检菌自纸片边缘向平板边缘划线。35℃培养18~24 h后观察结果。结果判断:美洛培南抑菌圈内出现矢状生长者为产碳青霉烯酶菌株[3]。
1.3 金属酶检测EDTA协同试验
用0.5麦氏单位的待检菌悬液涂布MH平皿 ......
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