Apelin—13(F13A)对M2型肿瘤相关巨噬细胞诱导的乳腺癌细胞侵袭的影响及机制(3)
1.2.5 划痕实验 MCF-7细胞,制成细胞悬液(1×105个细胞/孔)接种6孔培养板。将RAW细胞接种在Transwell上室,Transwell置于6孔培养板中,MCF-7生长融合至90%时,移除上室,100 μL移液器枪头垂直划,PBS洗2次。继续共培养48 h,倒置显微镜观察划痕中细胞的转移,拍照记录,图像分析软件测量划痕宽度,计算划痕愈合率=[(0 h划痕面积-48 h划痕面积)/0 h划痕面积×100%]。1.2.6 Transwell实验 RAW细胞(1×105个细胞/孔)接种于24孔板中。孔径为8.0 μm半透膜置于Transwell上室底部,加入基质胶,固化。MCF-7制成细胞悬液,接种于Transwell上室(5×105个细胞/孔),Transwell置于预接种了RAW的24孔板孔中,非接触共培养体48 h。移出上室,4%多聚甲醛固定,加入0.1%结晶紫溶液 ......
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