1.1 实验材料及来源

    PC12细胞购自中科院昆明动物所；脂质体2000(Lipofectamine 2000)购自Invitrogen公司产品；遗传霉素(G418)为Sigma产品；过氧化氢(H2O2)为天津市风船化学试剂科技有限公司产品；高糖培养基(DMEM)为Hyclone公司产品；胰蛋白酶购自GIBICO公司；胎牛血清为BI公司产品；DMSO购于上海生物工程有限公司；CCK-8细胞增殖-毒性检测试剂盒试剂为日本同仁公司产品；Hochest33258试剂为凯基公司产品；携带人ApoE3基因的质粒(pEGFP-N1-H-ApoE3)上海吉满公司构建。

    1.2 方法

    1.2.1 PC12细胞培养

    PC12细胞按常规细胞培养方式培养，将细胞接种于含10%胎牛血清、100 U/mL青霉素、100 mg/mL链霉素的DMEM培养基中，培养基置于37℃、5% CO2的细胞培养箱中。消化传代使用含有EDTA的0.25%胰酶，选取对数生长期细胞进行实验。

    1.2.2 基因转染及细胞筛选

    1.2.2.1 细胞转染 取对数生长期的PC12细胞经胰酶消化后，以1×105/mL密度接种于6孔板中，待细胞生长至80%融合时，取2 μg质粒加入到200 μL基础培养基中轻轻摇匀后在室温下放置5 min；取10 μL脂质体加入到200 μL基础培养基中轻轻摇匀后再在室温下放置5 min；然后混合稀释的脂质体和质粒轻轻摇匀 ......