6 小結

    Cas9具有明显的优点，是目前广泛使用的靶向工具不能比拟的。它大大提高在不同的生物体中设计和编辑基因和调节基因的表达的能力；为更容易区分出个体化基因功能铺平了道路；也将加快对体内冗长的基因的功能和表观遗传学研究；使得多基因的编辑变得更高效、简单，应用领域非常广泛。尽管以Cas9为基础的研究工具已被应用在许多模型生物中，但包括分子结构和Cas9的催化机制，PAM的依赖性和gRNA加载机制的几个基本属性尚不清楚。了解这些问题将有助于使Cas9编辑工程独立于PAM之外，扩大我们的选择目标，并产生高度精确的Cas9 gRNA的复合物，特别是用作人类治疗剂。目前所面临的主要挑战是脱靶的控制。上述工具是解决这一问题有效的方法[28]。此外，通过高通量的方法全面分析脱靶事件将有助于建立目标序列的选择规则、设计和编写程序 ......