[摘要] 目的 构建靶向血管扩张刺激磷蛋白(VASP)基因RNA干扰慢病毒表达载体。 方法 将前期构建的pcDNA6.2-miRVASP进行测序鉴定，筛选阳性克隆。通过Gateway技术中的BP反应及LR反应，将携带miRVASP的表达框克隆至慢病毒目的载体pLenti6/V5-DEST，构建靶向VASP基因的RNA干扰慢病毒表达载体pLenti6/V5-miRVASP；接着将其与慢病毒包装混合物共转染293FT细胞，收集病毒颗粒，侵染胃癌BGC-823细胞。 结果 慢病毒表达载体测序结果表明，构建的载体与预期完全一致。用收集的携带miRVASP表达框的慢病毒颗粒侵染BGC-823细胞，荧光显微镜下可见多量细胞表达强绿色荧光，证明包装产生的慢病毒颗粒能侵染BGC-823细胞。 结论 成功构建了靶向VASP基因的RNA干扰慢病毒表达载体 ......