人血脑屏障通透性相关基因Caveolin—1的克隆及其蛋白表达、纯化(3)
本研究依據基因库中公布的Caveolins-1序列，自行设计了Caveolins-1基因的上游及下游引物片段，并对该基因进行了PCR，得到了Caveolins-1的PCR产物。产物经纯化后与pET28a(+)载体连接，构建重组质粒pET28a-Caveolins-1，转化宿主菌DH5α，培养后挑取的单克隆菌落经序列分析后确定重组片段为人血脑屏障通透性相关的Caveolin-1基因全长cDNA。经IPTG诱导的含有pET28a-Caveolin-1重组质粒的DE3菌，表达出重组人Caveolin-1融合蛋白。重组蛋白经Ni2+-NTA亲和层析进行纯化后，得到了较高纯度的融合Caveolins-1蛋白。这为今后Caveolins-1治疗脑梗死的研究奠定了基础 ......
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