[摘要] 目的 克隆与人血脑屏障通透性相关基因Caveolin-1，并在大肠埃希菌中表达，最后进行蛋白纯化、鉴定。方法 根据基因库中收录的Caveolin-1基因序列，设计其上下游引物，经过PCR反应合成Caveolin-1双链，然后与pET28a(+)载体重组，筛选阳性克隆并对DNA序列分析鉴定。将已构建好的重组质粒pET28a-Caveolin-1转入化大肠埃希菌BL21(DE3)，异丙基硫代半乳糖苷诱导融合蛋白表达，表达产物经镍离子亲和层析(Ni2+-NTA)纯化，SDS-PAGE检测和Western blot鉴定。 结果 PCR扩增的Caveolin-1 DNA片段经鉴定确认为人Caveolin-1基因。经异丙基硫代半乳糖苷诱导的含有pET28a-Caveolin-1重组质粒的DE3菌表达出重组人Caveolin-1融合蛋白。重组蛋白经Ni2+-NTA亲和层析纯化 ......