我国胃癌发病率在各类肿瘤中位居第二位，每年因胃癌死亡的人数约20余万[1]，约占世界胃癌死亡人数的一半。75%的胃癌患者发现时已是晚期，其预后极差。转移是导致胃癌患者死亡的主要原因之一，而低氧微环境在肿瘤转移过程中发挥着重要的促进作用。然而，目前大多数肿瘤低氧微环境的相关研究中，其肿瘤细胞通常暴露于0.1%～1%的O2条件下培养24～72 h[2]。这种短期、急性低氧处理并不能完全反映肿瘤内部的真实情况，且常规培养的肿瘤细胞在体外低氧条件下仅能存活几天，严重限制了肿瘤低氧微环境的深入研究。为更真实地模拟肿瘤低氧微环境，本研究利用逐渐降低O2浓度的方法建立低氧耐性胃癌细胞系，并比较亲本胃癌细胞和低氧耐性胃癌细胞的基本生物学特性异同。以期为胃癌低氧微环境研究提供良好的模型。

    1 材料与方法

    1.1 试剂

    RPMI1640、DMEM培養基(均购自Gibco公司)、胎牛血清(购自Biological Industries公司)HIF-1α、HIF-2α、Glut1、ZO-1、vimentin、MUC1、integrinα5、integrinβ1、β-actin抗体(购自Santa Cruz公司或Cell Signaling Technology公司)、羊抗鼠和羊抗兔辣根过氧化物酶标记的二抗(购自北京中杉金桥生物技术有限公司)、ECL检测试剂盒(购自PIERCE公司) ......