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编号:13321744
RP-HPLC法测定可溶性CD95-Fc融合蛋白中异天冬氨酸的含量(1)
http://www.100md.com 2019年2月25日 《中国医药导报》 2019年第6期
RP-HPLC法测定可溶性CD95-Fc融合蛋白中异天冬氨酸的含量,脱酰胺修饰,反相高效液相色谱
     [摘要] 目的 测定可溶性CD95-Fc融合蛋白中异天冬氨酸(IsoAsp)含量。 方法 采用ISOQUANT?誖异天冬氨酸检测试剂盒结合反相高效液相色谱法测定样品中IsoAsp含量,采用Phenomenex Synergi 4 μm Hydro RP-80 C18色谱柱(150 mm × 3 mm,4 μm),以7.9 mmol/L磷酸二氢钾-1.1 mmol/L磷酸氢二钾-10%甲醇为流动相A,以甲醇为流动相B,梯度洗脱,流速为0.43 mL/min。 结果 对照品和3批原液中IsoAsp含量相近(0.30~0.32 mol/mol sCD95-Fc),3批成品中IsoAsp含量明显增高(0.51~0.53 mol/mol sCD95-Fc);25℃和37℃处理24 h后成品中IsoAsp含量无明显变化,60℃处理后明显增加 ......
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