1.2 细胞培养、PD细胞模型建立及实验分组

    从液氮罐中取出冻存MN9D细胞管，迅速放入37°C水浴后，离心半径13 cm，1000 r/min离心5 min后弃上清，沉淀物用DMEM/F12+10% NCS培养液混悬，吸出细胞悬液，用适量培养液稀释后，转入无菌培养瓶37°C、5%CO2细胞培养箱培养，次日更换培养液，细胞培养48 h进入指数生长期后进行传代培养并进行试验。将MN9D细胞接种于Poly-L-lysine包被的96孔板，接种密度为1×105/mL，每孔接种体积为100 μL。细胞稳定培养24 h后更换含5% NCS的DMEM/F12培养基。不同浓度(0、50、100、200、300、400 μmol/L)的MPP+损伤MN9D细胞12～48 h后观察细胞存活率，筛选出最适浓度(100 μmol/L)MPP+，制备PD细胞模型;细胞接种于96孔板培养24 h，分别加入不同浓度(1、10、100 μmol/L)的FUC预保护1 h后，加入100 μmol/L的MPP+作用24 h ......