在冰水浴上的PCR管中依次加入样品、16.1 μL ddH2O、1.5 μL cDNA、2.5 μL 10×PCR Buffer、2.5 μL dNTP、1.3 μL MgCl2，最后加入0.1 μL Taq酶，各0.5 μL上游引物和下游引物，使PCR管内终体积达到25 μL。将PCR管放入PCR扩增仪上扩增。引物的设计与合成由上海生工生物工程技术服务有限公司提供，以GAPDH为内参照。见表1。

    1.10 统计学方法

    采用SPSS 18.0统计学软件进行数据分析，计量资料用均数±标准差(x±s)表示，多组间比较采用单因素方差分析;计数资料用率表示，组间比较采用χ2检验，以P < 0.05为差异有统计学意义。

    2 结果

    2.1 UVB照射剂量测定

    照射剂量<25 mJ/cm2，基本不影响成纤维细胞的活力;照射剂量>25 mJ/cm2，明显抑制细胞活性。提示25 mJ/cm2开始对成纤维细胞造成损伤，且随着剂量的增大，细胞活力降低更明显，呈剂量依赖性，UVB照射(25 mJ/cm2)对HSF细胞没有明显细胞毒性作用 ......