循环肿瘤细胞在结直肠癌方面的研究进展(1)
[摘要] 近年来，随着生活方式及饮食结构的变化，我国结直肠癌发病率和死亡率呈上升趋势。检测外周血液中循环肿瘤细胞(CTC)对于结直肠癌的早期诊断、治疗效果监测、预后方面评估有重要意义。CTC是指因自发或诊疗操作脱离实体瘤从肿瘤原发灶或转移灶进入外周血循环中的肿瘤细胞。观察CTC数目变化对于结直肠癌的个体化诊疗有重要的临床意义。本文旨在对近年来CTC的检测技术及其在结直肠癌方面的诊断、治疗、预后的临床研究进展进行综述。
[关键词] 结直肠癌;循环肿瘤细胞;预后;复发;转移
[中图分类号] R735 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210(2019)08(a)-0062-04
[Abstract] In recent years， with the changes of lifestyle and diet structure， the incidence and mortality of colorectal cancer in China are on the rise. The detection of circulating tumor cells (CTC) in peripheral blood has important significance for the early diagnosis， therapeutic effect monitoring and prognosis assessment of colorectal cancer. CTC refers to the tumor cells that have separated from solid tumor and entered the peripheral blood circulation from the primary tumor or metastatic tumor due to spontaneous or clinical operation. Observing the number changes of CTC has important clinical significance for the individualized diagnosis and treatment of colorectal cancer. This article aims to review the recent progress of CTC detection technology and clinical research on diagnosis， treatment and prognosis of colorectal cancer.
[Key words] Colorectal cancer; Circulating tumor cells; Prognosis; Recurrence; Transfer
在中国，结直肠癌死亡率位居中国癌症的第5位，并且发病率和死亡率逐年增加[1]。结直肠癌是导致美国癌症相关死亡的第二大原因，在2017年有135 430个新发病例，约有50 260人死亡[2]。Ⅳ期患者5年生存率低于10%[3]，Ⅱ期或者Ⅲ期患者中，即使在根治性手术或者辅助化疗后仍有25%～50%的复发率[4]。因此，临床上需要一个前瞻性的生物标志物来更好地预测结直肠癌复发转移情况、治疗效果等，而循环肿瘤细胞(circulating tumor cell，CTC)就是目前广泛研究的生物标志物。
1 CTC
1.1 CTC概述
近年来，循环肿瘤细胞液体活检技术作为一种能获得实时诊断和预后信息的方法受到了广泛关注[5]。CTC是澳大利亚学者Ashworth[6]在1969年首次提出的概念，是指因自發或诊疗操作脱离实体瘤从肿瘤原发灶或转移灶进入外周血循环中的肿瘤细胞。通常大部分侵入循环系统的肿瘤细胞会在短期内死亡，但会有极少部分具有高度活力、高度转移潜能的肿瘤细胞存活下来，它们相互聚集形成微小癌栓，并在一定条件下形成微转移灶。因此，在外周血循环中检测到CTC，提示肿瘤可能发生了转移[7]。结直肠癌患者血液中的CTC不仅包括上皮肿瘤细胞，也包括经上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition，EMT)的肿瘤细胞和肿瘤干细胞[8]。恶性肿瘤细胞为获得运动性和侵袭性，会丢失某些上皮细胞的表型，包括形态、表面抗原、基因表达等，与此同时获得某些间充质细胞的表型，这就是EMT[8]。
1.2 CTC检测方法
由于107个血细胞中只含有1个CTC[9]，因此，检测外周血CTC，首先要进行CTC的富集(分离和纯化)，根据检测前是否采用免疫磁珠等技术富集血液标本中的肿瘤细胞而分为阳性富集法和阴性富集法[10]。常用的检测方法有免疫细胞化学法(immunocytochemistry，ICC)法、流式细胞术(flow cytometry，FCM)、PCR酶聚反应、免疫磁珠分离检测法、光导纤维阵列扫描技术(fiber-optic array scanning technology，FAST)、微流控芯片法(CTC-Chip)[11]。目前常用的Cell Search系统是采用磁珠结合特异性抗原的方法，分离出血液中的上皮细胞，主要原理是通过筛选CK+、DAPI+、CD45-细胞来实现CTC的分离[12]，该系统是唯一已通过美国食品药物管理局(FDA)批准，并用于转移性乳腺癌、结直肠癌以及前列腺癌患者的CTC检测[13-14]。
2 CTC对于结直肠癌的临床价值
2.1 CTC对于早期结直肠癌的诊断价值, 百拇医药(张月 韩振国)
[关键词] 结直肠癌;循环肿瘤细胞;预后;复发;转移
[中图分类号] R735 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210(2019)08(a)-0062-04
[Abstract] In recent years， with the changes of lifestyle and diet structure， the incidence and mortality of colorectal cancer in China are on the rise. The detection of circulating tumor cells (CTC) in peripheral blood has important significance for the early diagnosis， therapeutic effect monitoring and prognosis assessment of colorectal cancer. CTC refers to the tumor cells that have separated from solid tumor and entered the peripheral blood circulation from the primary tumor or metastatic tumor due to spontaneous or clinical operation. Observing the number changes of CTC has important clinical significance for the individualized diagnosis and treatment of colorectal cancer. This article aims to review the recent progress of CTC detection technology and clinical research on diagnosis， treatment and prognosis of colorectal cancer.
[Key words] Colorectal cancer; Circulating tumor cells; Prognosis; Recurrence; Transfer
在中国，结直肠癌死亡率位居中国癌症的第5位，并且发病率和死亡率逐年增加[1]。结直肠癌是导致美国癌症相关死亡的第二大原因，在2017年有135 430个新发病例，约有50 260人死亡[2]。Ⅳ期患者5年生存率低于10%[3]，Ⅱ期或者Ⅲ期患者中，即使在根治性手术或者辅助化疗后仍有25%～50%的复发率[4]。因此，临床上需要一个前瞻性的生物标志物来更好地预测结直肠癌复发转移情况、治疗效果等，而循环肿瘤细胞(circulating tumor cell，CTC)就是目前广泛研究的生物标志物。
1 CTC
1.1 CTC概述
近年来，循环肿瘤细胞液体活检技术作为一种能获得实时诊断和预后信息的方法受到了广泛关注[5]。CTC是澳大利亚学者Ashworth[6]在1969年首次提出的概念，是指因自發或诊疗操作脱离实体瘤从肿瘤原发灶或转移灶进入外周血循环中的肿瘤细胞。通常大部分侵入循环系统的肿瘤细胞会在短期内死亡，但会有极少部分具有高度活力、高度转移潜能的肿瘤细胞存活下来，它们相互聚集形成微小癌栓，并在一定条件下形成微转移灶。因此，在外周血循环中检测到CTC，提示肿瘤可能发生了转移[7]。结直肠癌患者血液中的CTC不仅包括上皮肿瘤细胞，也包括经上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition，EMT)的肿瘤细胞和肿瘤干细胞[8]。恶性肿瘤细胞为获得运动性和侵袭性，会丢失某些上皮细胞的表型，包括形态、表面抗原、基因表达等，与此同时获得某些间充质细胞的表型，这就是EMT[8]。
1.2 CTC检测方法
由于107个血细胞中只含有1个CTC[9]，因此，检测外周血CTC，首先要进行CTC的富集(分离和纯化)，根据检测前是否采用免疫磁珠等技术富集血液标本中的肿瘤细胞而分为阳性富集法和阴性富集法[10]。常用的检测方法有免疫细胞化学法(immunocytochemistry，ICC)法、流式细胞术(flow cytometry，FCM)、PCR酶聚反应、免疫磁珠分离检测法、光导纤维阵列扫描技术(fiber-optic array scanning technology，FAST)、微流控芯片法(CTC-Chip)[11]。目前常用的Cell Search系统是采用磁珠结合特异性抗原的方法，分离出血液中的上皮细胞，主要原理是通过筛选CK+、DAPI+、CD45-细胞来实现CTC的分离[12]，该系统是唯一已通过美国食品药物管理局(FDA)批准，并用于转移性乳腺癌、结直肠癌以及前列腺癌患者的CTC检测[13-14]。
2 CTC对于结直肠癌的临床价值
2.1 CTC对于早期结直肠癌的诊断价值, 百拇医药(张月 韩振国)