1 材料与方法

    1.1 研究对象

    选取2017年1月～2018年10月解放军空军军医大学唐都医院(以下简称“我院”)骨科收治的60例骨肉瘤患者(骨肉瘤组织)和同期60例软骨组织(正常组织)为研究对象。纳入标准：首次就诊，且经我院病理检验科诊断证实，均未经任何治疗。排除标准：①患有严重传染性疾病和血液传染病;②依从性差，无法配合研究者;③合并严重感染、心脑血管疾病以及肝肾功能严重障碍者;④合并其他骨病或系统性疾病。本研究方法和目的均告知患者和家属，并签署知情同意书，研究获得我院医学伦理委员会批准。

    1.2 材料

    骨肉瘤细胞系MG-63购自中国科学院上海细胞庫;蛋白定量试剂盒(P503021-0500)、SDS凝胶试剂盒(P0012A)、细胞裂解液(P0013)、结晶紫(P8470-25g)均购自上海吉玛生物有限公司;DMEM(SH30021)、胎牛血清(SH30406)、胰蛋白酶消化液(SV30042)购自美国HyClone;青链霉素混合液(P1400)、4%多聚甲醛(P1110)、苯胺蓝(28631-66-5)和苏木精(C0107)均购自武汉依科有限公司;Actin(ab179467)、PI3K(ab32089)、p-Smad7(ab114358)和兔二抗(ab150077)购自英国Abcam ......