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编号:13440325
血液来源表皮葡萄球菌生物被膜形成能力及agr基因多态性调查(2)
http://www.100md.com 2019年11月15日 《中国医药导报》 2019年第32期
     1 材料与方法

    1.1 菌株收集

    SE来自于2012年3月~2015年2月四川省人民医院住院患者分离的血液来源菌株,无重复菌株,所有菌株采用全自动微生物分析系统VITEK 2.0鉴定。

    1.2 仪器和试剂

    PCR反应试剂盒(北京康为世纪公司,批号:40111);DNA提取液(达安基因公司,批号:20190226);结晶紫(Baso公司,批号:419012);PTC-200型PCR扩增仪(美国Bio-Rad公司)。

    1.3 DNA的提取

    常规复苏菌株,接种于血平板,置37℃,5%CO2培养20 h,挑起单克隆于1 mL的生理盐水中,10 000 r/min离心5 min,离心机半径9.5 cm,去上清,收集细菌。加入30 μL的DNA提取液,吹打混匀,100℃加热10 min,冷却后10 000 r/min离心5 min,离心机半径9.5 cm,上清液即为含有DNA溶液。

    1.4 生物被膜表型分析

    生物被膜形成能力的检测参照Vuong等[4]的报道,接种于液体LB培养基中,通过37℃,220 r/min振摇培养20 h ......
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