脂肪间充质干细胞来源外泌体对缺氧/复氧诱导的心肌细胞凋亡的影响
2 结果2.1 mASCs-Exo分离和鉴定
透射电子显微镜(TEM)下观察mASCs-Exo呈圆形囊泡状,质膜边缘清晰,中间颜色较边缘深(图1A)。纳米颗粒示踪分析技术(NTA)结果显示粒子大小在30~120 nm范围,平均(47.5±0.5)nm,与Exo特征一致(图1B)。WB显示Exo特异性标志蛋白CD9/CD63阳性表达(图1C)。分离获得的囊泡即为Exo。
2.2 小鼠原代心肌细胞提取和鉴定
2.2.1 小鼠原代心肌细胞形态观察与鉴定 光镜下观察心肌细见刚分离单个未贴壁心肌细胞结构完整,呈圆形,恒温培养2 d后大部分心肌细胞贴壁,细胞分散,呈椭圆形或菱形,中央高亮,出现自主搏动,频率缓慢(4~15次/min)。4 d后细胞融成集落,搏动频率一致且呈放射状(30~50次/min)。7 d后观察细胞搏动频率减弱,体积缩小并逐渐脱落(图2A,封三)。三色免疫荧光鉴定心肌细胞纯度 ......
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