益气活血方治疗心力衰竭的内质网应激机制研究(3)
1.4 观察指标1.4.1 血流动力学检测 大鼠经1%戊巴比妥钠(5 mL/kg)腹腔注射,麻醉后仰卧,橡皮筋固定于鼠板,络合碘消毒颈部正中皮肤后用酒精脱碘,钝性分离颈前肌群并暴露右颈总动脉,虹膜剪横向剪开动脉约1 mm,将导管插管(经肝素冲灌)插入左心室,等待大鼠稳定3~5 min后开始生物机能实验信号采集系统(成都泰盟软件有限公司,BL-420S)检测。检测指标主要包括:心率(HR)、左心室收缩压(LVSP)、左心室舒张终末压(LVEDP)、左心室内压最大上升速率(+dp/dt max)、左心室内压最大下降速率(-dp/dt max)。
1.4.2 Rt-PCR法检测心力衰竭大鼠心肌组织钙调神经磷酸酶A(CaNA)、脑钠肽(BNP)基因在mRNA水平的表达 剪取心力衰竭大鼠心肌梗死边缘区组织,冰上匀浆后,用Trizol法提取总RNA,核酸紫外分光光度计测定光密度(OD)260/280,并计算总RNA浓度及纯度;逆转录2 μg总RNA,根据说明书配制20 μL反应体系,最终得到cDNA链,反转录条件:42℃ 60 min、70℃ 5 min ......
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