1.2 方法

    1.2.1 细胞培养 U373细胞(上海生命科学院细胞资源中心)培养在10% FBS的DMEM培养基中，置于37℃、5% CO2的培养箱中培养。每2～3天换液一次。

    1.2.2 分组药物处理 分别加入0、1、3、5 μg/mL UA作用U373细胞24 h或加入5 μg/mL UA作用U373细胞0、12、24 h和48 h。

    1.2.3 Western blot测定蛋白表达 实验结束后，收集细胞，按照本研究组前期实验[7]方法提取蛋白。配制10%分离胶和5%浓缩胶，加入等量蛋白样品电泳，转至PVDF膜，5%脱脂奶粉室温封闭1 h，加入Y188(1∶3000)抗体，4℃孵育过夜。TBST洗3次，二抗(1∶5000)室温孵育1 h，TBST漂洗后显影成像。Quantity-One软件分析蛋白灰度。

    1.2.4 酶联免疫吸附试验检测Aβ1-40含量 收集各组细胞样品，RIPA裂解30 min，4℃、12 000 r/min离心10 min ......