1.2 细胞培养

    含10%胎牛血清的DMEM培养基(含青链霉素)培养细胞，克隆至70%～80%更换培养基;培养箱条件：37℃、50 mL/L CO2。

    1.3 RT-PCR

    检测各细胞株中lncRNA ROR1-AS1的表达。TRIzol法提总RNA，并检测纯度及浓度。依据TaKaRa公司说明书进行逆转录和PCR反应。反应体系20 μL： 2×SYBR Premix Ex Taq 10 μL;上、下游引物各0.4 μL;cDNA 5 μL;双蒸水4.2 μL。设定程序为两步法RT-PCR：预变性 95℃，1 min;之后每一步变性95℃，5 s;退火延伸 60℃，20 s;共进行40个循环。每次在延伸阶段读取吸光值。lncRNA ROR1-AS1的上游引物序列为5′-CTGACGAAACACTGGAACTC-3′，下游引物序列为5′-GTCTGATTTGGTAGCTTGGATG-3′;ROR1的上游引物序列为5′-CAGATGAGTATGAAGAAGATGG-3′ ......