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编号:13807944
一种基于RNA-seq验证的人肾癌细胞和正常细胞原代培养方法(2)
http://www.100md.com 2020年9月15日 《中国医药导报》 202026
     1 材料与方法

    1.1 主要试剂和材料

    原代HRTC培养于含10%胎牛血清的IMDM(Gibco,12440053)培养基中。原代HPTEC培养于肾脏上皮细胞生长专用培养基(PromoCell,c-26030)中。细胞培养用青霉素/链霉素溶液,0.05%胰蛋白酶EDTA溶液,不含CaCl2和MgCl2的HBSS缓冲液均购自于Gibco,Ⅱ型胶原酶购自于worthington(LS004176-1GM)。碱性磷酸酶试剂盒购自于南京建成生物工程研究所(D001-1-1)。Pan-Cytokeratin(CK)抗体(ZM-0069)、α-SMA抗体(ZM-0003)、Vimentin抗体(ZM-0260)、PAX8抗体(ZM-0468)和S-P偶联免疫组织化学试剂盒(SP-9000)购自于北京中山金桥生物技术有限公司。100、70、40 μm细胞筛购自于BD FalconTM。

    1.2 HRTC和HPTEC的分离、培养、冻存

    1.2.1 HRTC和HPTEC的分离 选取首都医科大学附属北京朝阳医院(以下简称“我院”)行肾癌根治性切除术和肾部分切除术后的手术标本 ......
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