几种蛋白质含量测定方法的比较
【文章摘要】蛋白质与生命的起源、 存在和进化都密切相关, 蛋白质含量测定涉及到生产和科研的众多领域。 目前常用的方法有凯氏定氮法、 双缩脲法、 Lowry法、紫外吸收法、Bradford法、HPLC法。 本文总结各种方法的特点及适用条件, 针对不同的待测样品以及对测定结果准确性的要求不同, 我们可以采用不同的方法来测定样品中蛋白质的含量。
【关键词】
蛋白质;凯氏定氮法;紫外吸收法;Bradford法;Lowry法;HPLC法
1 引言
蛋白质是复杂的含氮有机化合物, 主要是由各种氨基酸构成。它是谷物、食品、饲料及其它农副产品的重要成份,亦是重要的营养物质, 因此测定蛋白质含量以及对蛋白质组成的分析处于重要的位置,在农产品加工、营养卫生、国际贸易以及近代农作物育种等方面均受到高度重视,并不断改进蛋白质的测定方法。
2 凯氏定氮法
2.1原理
其原理是根据蛋白质是含氮的有机化合物,样品与硫酸和催化剂一同加热消化,使蛋白质分解产生氨,氨与硫酸结合生成硫酸铵。然后碱化蒸馏使氨游离,用硼酸吸收后再以硫酸或盐酸标准溶液滴定,根据酸的消耗量乘以换算系数,即为蛋白质含量。凯氏定氮法测定的是样品中含氮量。
2.2特点
凯氏定氮法是经典的测定蛋白质的方法,该法的优点是适用范围广,可用于动植物的各种组织、器官及食品等组成复杂样品的测定 ......
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