1.2.5 细胞划痕实验人牙周膜细胞接种于含10%血清60 mm培养皿中，置于37℃、5%CO～饱和湿度的培养箱内培养，待细胞覆盖皿80%以上时，在单层细胞表面用10μL无菌枪头划一直线，PBS洗3遍，弃去培养液，激光照射后立即加入含3%胎牛血清的培养液培养24 h，于照射后0、24 h拍照观察各组间划痕愈合情况。

    1.2.6 ELISA检测人牙周膜细胞TGF-β1的分泌情况

    激光照射后立即加入含3%胎牛血清的培养液培养48 h，收集各组0、12、24、48 h细胞上清，保存于-20℃冰箱。严格按照人TGF-β1试剂盒说明书检测细胞上清中TGF-β1的含量，在ELISA仪上测量波长450mml时吸光值。

    1.3 统计学分析

    采用统计学软件SPSS 17.0进行数据分析，采用ANOVA单因素方差分析，检验水准a=0.05。

    2 结果

    2.1 细胞培养和鉴定

    人牙周膜细胞酶消化法原代培养的第三天即可在镜下观察到细胞，细胞多呈长梭形，胞体丰满，细胞质均匀，免疫细胞化学染色波形蛋白阳性，角蛋白阴性，证明细胞来源于中胚层，结合取样部位及细胞镜下形态，确定为人牙周膜成纤维细胞 ......