张永旺李灵芝* 龚海英吕 琪董 培

    葛根素对MCF-7细胞的雌激素样促增殖作用※

    张永旺1李灵芝2* 龚海英2吕 琪2董 培2

    目的以乳腺癌细胞株MCF-7为靶细胞，考察葛根素对其细胞形态及增殖的影响。方法以人乳腺癌细胞株MCF-7为靶细胞，以雌酚酮1×10-8mol/L为阳性对照，同时设空白对照组，葛根素干预组分为1×10-8mol/L、1×10-7mol/L、1×10-6mol/L三个浓度组。①调整细胞浓度为4×104个/L，接种于12孔培养板上。48h后，倒置显微镜下观察细胞形态变化。②调整细胞浓度为2×104个/L，接种于96孔培养板，采用四唑盐法测定各孔的吸光度，计算平均增殖率。上述实验每组均设8个复孔。③调整活细胞浓度为0.9×104个/ml，接种于24孔培养板。24h后，每组设12个复孔。每天随机从每组细胞中各选出3个孔，染色后在光镜下计数活细胞数，取平均值。连续计数3天，以时间为横坐标，活细胞数为纵坐标，作图得细胞生长曲线。结果经葛根素1×10-7mol/L、1×10-6mol/L处理后第1天、第2天和第3天，与空白对照组相比，增殖速度均加快。结论葛根素可剂量依赖地促进MCF-7细胞的增殖，提示其具有弱雌激素样作用。

    葛根素/药理学；乳腺癌细胞/药物作用；细胞培养；细胞增殖/药物作用

    葛根素是中药葛根的主要有效成分，其结构与植物性雌激素大豆异黄酮极其相似。推测其可能与大豆异黄酮一样具有弱雌激素活性。本实验以雌激素依赖性乳腺癌细胞株MCF-7为靶细胞，考察了不同浓度的葛根素对乳腺癌MCF-7增殖影响，以研究葛根素的雌激素活性。

    1 材料和方法

    1.1材料

    1.1.1 细胞株、药品及试剂乳腺癌MCF-7细胞由武警医学院细胞生物教研室提供，购自北京大学细胞培养实验室。葛根素(Puerarin)购自中国药品生物制品检定所，雌酚酮购自浙江仙居制药厂。α-MEM(Minimum Essential Medium Alpha Modification)培养基购自Gibco公司；胎盼蓝、3-(4，5-二甲基噻唑-2)-2，5-二苯基-四唑氢溴酸盐(MTT)、胰蛋白酶(Trypsin)、Hepes为美国Sigma公司产品；胎牛血清(FBS)购自中国医学科学院血液学研究所；氨苄青霉素(Ampicilin sodium salt)、链霉素(Streptomysin)均为美国Amresco公司产品；二乙醇胺(DEA)购自北京中联化工试剂厂；对硝基苯酚磷酸钠(PNPP)为Sigma分装 ......