李 鹏

    去纤维蛋白核苷酸的分离与活性的初步测定

    李 鹏

    本实验以猪肺为原料制备分离去纤维蛋白核苷酸，采用定磷法测定其含量，并通过动物实验考察了它在体内、外的抗凝活性。

    去纤维蛋白核苷酸；活性；作用

    去纤维蛋白核苷酸是一种多聚脱氧核糖核酸盐。1981年被评定为Defibrotieie(简称DEF)。七十年代，意大利学者[1]Niada.R等发现DEF纤溶作用机理是DEF通过促进血管壁产生和释放组织纤溶酶原激活物(t-Pa)发挥效应。近年，Niada.R又发现其具有抗血栓作用。经过人们大量的研究工作发现了DEF除此之外还具有抗局部缺血、抗粥样硬化等作用。

    1 材料与方法

    1.1 材料猪肺。试剂：0.1M Nacl+柠檬酸钠0.05M混合液。氯仿：异戊醇(24：1 v/v)(沈阳试剂一厂)。分析纯KH2PO4(北京化工厂)。牛血清白蛋白(上海医学化验所)。定磷试剂、试剂甲、试剂乙(自行配制)。仪器：组织搅拌机、DS-1组织匀浆机、20PR-5冷冻离心机、紫外分光光度计等。动物：小白鼠18～20g、兔子。

    1.2 制备方法[2]猪肺细胞核沉淀DNP沉淀水相(DNA钠盐)。①加适量混合液、捣碎、匀浆、离心、收集细胞核；②用1.71M Nacl提取DNP；③注入蒸馏水中，有沉淀、离心、收集DNP；④用1.71M Nacl溶解、离心加适量氯仿-异戊醇除蛋白；⑤离心、收集水相；⑥注入无水乙醇 ......