华法林钠是一种双香豆素类抗凝药物[1]，其能抑制肝脏内凝血酶原和凝血因子合成。该药物口服于胃肠道吸收迅速而完全，临床上常制成片剂用于辅助治疗肺栓塞、术后栓塞、心肌梗死等血栓栓塞性疾病[2]。华法林钠用量少，规格通常为每片2.5 mg，过量使用易致各种出血，针对肝肾功能不全、活动性溃疡、严重高血压、脑出血患者需慎用[3]。因此，需要灵敏、准确的测定方法作为华法林钠片质量控制的有效方法[4]。近年来，国内外学者对测定华法林钠含量的方法进行了较多研究[5]，但对采用高效液相色谱(HPLC)-荧光检测法测定华法林钠片的含量却鲜有报道。HPLC-荧光检测法灵敏，简便，快捷。本研究就 HPLC-荧光检测法测定华法林钠片的含量，现报道如下。

    1 仪器与试剂

    1.1 仪器高效液相色谱仪(日本岛津公司)；HW-2000色谱工作站；AY120D电子天平(日本岛津公司)；UV1101紫外-可见分光光度计(上海天美科学仪器有限公司)；DL-360超声波清洗仪；HP-01溶剂过滤器；ELGA超纯水仪。

    1.2 试剂与试药华法林钠片(上海信宜九福药业有限公司，规格：2.5 mg/片，批号：080701、070603、080901)；华法林钠化学原料药(由上海信宜九福药业有限公司提供，纯度99.2%)；所用试剂甲醇为色谱纯，其余均为分析纯，水为超纯水。

    2 方法与结果

    2.1 溶液配制

    2.1.1 对照溶液配制精密称取华法林钠化学原料药50.7 mg，置于50 ml容量瓶中，加适量甲醇至刻度，摇匀，配制成1.006 mg/ml的华法林钠对照贮备溶液[6]。精密量取5 ml，置于25 ml容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，精密量取2 ml，置于25 ml容量瓶中，加流动相至刻度，摇匀，配制成16.1 μg/ml的华法林钠对照溶液。

    2.1.2 供试品溶液配制取样品华法林钠20片，精密称定，研细，混匀。精密称取适量(约相当于华法林钠5.0 mg)，置于25 ml容量瓶中，加甲醇约15 ml，超声 10 min，搅拌使其充分溶解，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，用移液瓶量取续滤液2 ml，置于25 ml容量瓶中，加流动相至刻度，摇匀，用滤膜过滤，配制成供试品溶液。

    2.1.3 阴性空白对照溶液按中国药典处方自制空白片 ......