帕金森病和正常人外周血单个核细胞的蛋白质组差异分析
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区健刚 梁清华 曾年菊 熊新贵 陈疆 刘爱平 张雨星 萧梅芳 中南大学湘雅医院中西医结合研究所 中南大学湘雅医院中西医结合研究所 中南大学湘雅医院中西医结合研究所 中南大学湘雅医院中西医结合研究所 中南大学湘雅医院远程医疗中心 中南大学湘雅医院中西医结合研究所 中南大学湘雅医院中西医结合研究所 中南大学湘雅医院中西医结合研究所
【摘要】目的:通过研究帕金森病和正常外周血单个核细胞(PBMC)的蛋白质组差异,初步探讨外周免疫系统与帕金森病的病理联系方法:用固相pH梯度双向凝胶电泳分离人帕金森病和正常单个核细胞总蛋白质,考马斯亮蓝染色,PDQuest 2-DE软件分析,对部分差异蛋白质点进行基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)测定其胶内酶解后的肽质指纹图谱,用Mascot查询系统查询SWISS-PROT数据库。结果:获得了分辨率和重复性均较好的双向电泳考染图谱,对其中的21个差异蛋白质点分别进行肽质指纹分析,经数据库查询,初步鉴定为一些与蛋白降解、抗氧化应激、信号转导、细胞骨架、细胞周期调控等有关的蛋白质。结论:建立了帕金森病PBMC的双向凝胶电泳图谱,提示帕金森病和正常的PBMC的蛋白质表达具有差异。
【关键词】 帕金森病 单个核细胞 双向凝胶电泳 质谱
【基金】国家自然科学基金重大研究计划(90409002) 湖南省自然科学(06JJ20012)
【分类号】R742.5
前言帕金森病是中老年常见的第二大神经系统变性疾病，仅次于Alzheimer病。以黑质多巴胺(DA)能神经元变性缺失和路易小体(Lewy body)形成为特征。自Abramsky等于1978年提出免疫学异常可能是PD发病的王要影响因素之一以来川，越来越多的研究表明，PD中枢神经变性及黑质，纹状
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摘要目的：通过研究帕金森病和正常外周血单个核细胞(PBMC)的蛋白质组差异，初步探讨外周免疫系统与帕金森病的病理联系。方法：用固相pH梯度双向凝胶电泳分离人帕金森病和正常单个核细胞总蛋白质，考马斯亮蓝染色，PDQuest 2-DE软件分析，对部分差异蛋白质点进行基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)测定其胶内酶解后的肽质指纹图谱，用Mascot查询系统查询SWISS-PROT 数据库。结果：获得了分辨率和重复性均较好的双向电泳考染图谱，对其中的21 个差异蛋白质点分别进行肽质指纹分析，经数据库查询，初步鉴定为一些与蛋白降解、抗氧化应激、信号转导、细胞骨架、细胞周期调控等有关的蛋白质。结论：建立了帕金森病PBMC 的双向凝胶电泳图谱，提示帕金森病和正常的PBMC 的蛋白质表达具有差异。
关键词：帕金森病；单个核细胞；双向凝胶电泳；质谱
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