大鼠Y染色体探针的制备与鉴定
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赵洪雯 余荣杰 彭侃夫 刘宏 吴雄飞 第三军医大学附属西南医院肾科 第三军医大学附属西南医院肾科 第三军医大学附属西南医院肾科 第三军医大学附属西南医院肾科 第三军医大学附属西南医院肾科
【摘要】目的:研究制备地高辛标记的大鼠性别决定基因Y区(Y染色体,SRY)探针,用于检测雄性大鼠来源的细胞在雌性受鼠体内的SRY基因表达情况。方法:按已知的雄性大鼠Y染色体上性别决定基因(SRY)的序列,请上海博亚公司合成oligoDNA,采用PCR技术连接并扩增,地高辛标记的方法制备基因探针。以雌性大鼠为对照,原位杂交法检测大鼠肾组织切片Y染色体阳性细胞情况。结果:用原位杂交法证实在雄性大鼠肾脏内有SRY表达,而雌性大鼠肾脏无Y染色体阳性细胞,证实这种探针具有较高的敏感性和特异性。结论:大鼠性别决定基因SRY探针的制备成功,为进一步研究异体雄性大鼠细胞移植后的分布和表达提供了实验基础。
【关键词】 大鼠 SRY基因 DNA探针 地高辛标记
【分类号】Q78
前言目前，使用骨髓源干/祖细胞来修复缺血组织器官损伤的研究已成为关注的热点。在研究中，探讨骨髓源干/祖细胞在体内迁移和整合的细胞标记方法主要有基因标记卜刀和用Y染色体原位杂交法追踪Ia9]。由于真核表达载体表达效率和表达时限的限制llto’1，移植到体内的基因标记
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摘要目的：研究制备地高辛标记的大鼠性别决定基因Y区(Y染色体，SRY)探针，用于检测雄性大鼠来源的细胞在雌性受鼠体内的SRY基因表达情况。方法：按已知的雄性大鼠Y 染色体上性别决定基因(SRY)的序列，请上海博亚公司合成oligoDNA，采用PCR 技术连接并扩增，地高辛标记的方法制备基因探针。以雌性大鼠为对照，原位杂交法检测大鼠肾组织切片Y 染色体阳性细胞情况。结果：用原位杂交法证实在雄性大鼠肾脏内有SRY 表达，而雌性大鼠肾脏无Y 染色体阳性细胞，证实这种探针具有较高的敏感性和特异性。结论：大鼠性别决定基因SRY 探针的制备成功，为进一步研究异体雄性大鼠细胞移植后的分布和表达提供了实验基础。
关键词：大鼠；SRY 基因；DNA探针；地高辛标记
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