不同方法测定聚乙二醇化天花粉蛋白的修饰度
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孙彦华 程婷 戎隆富 许培 宋礼华 安徽中医学院药学院 安徽安科生物工程(集团)股份有限公司 安徽安科生物工程(集团)股份有限公司 安徽安科生物工程(集团)股份有限公司 安徽安科生物工程(集团)股份有限公司
【摘要】目的:建立测定PEG化天花粉蛋白修饰度的方法。方法:利用电泳法初步确定PEG-TCS的分子量、用质谱法进行验证;通过TNBS法和荧光胺法测定其修饰度。结果:从质谱法和电泳法可知PEG-TCS的理论修饰度为9.0909%,TNBS法测得的修饰度为9.8613%%,荧光胺法所测得值为8.5955%。TNBS法测定结果尽管偏大,但是操作简单,不需要专门的仪器;荧光胺法需要荧光分光光度计,且丙酮易挥发。结论:TNBS法可作为测定PEG-TCS修饰度的方法。
【关键词】 修饰度 聚乙二醇化天花粉蛋白 TNBS 荧光胺
【分类号】R927
前言聚乙二醇(PEG)是一种无毒的线型分子，因其结构特点而具有水溶性、免疫学惰性和分子改变性，因此PEG可用来修饰蛋白质药物。蛋白质药物经PEG修饰后免疫原性和毒性降低，半衰期延长，稳定性提高叩]o天花粉蛋白(T行ehosanthin，Tes)是来源于多年生宿根草质藤木括楼或瓜篓[T
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摘要目的：建立测定PEG化天花粉蛋白修饰度的方法。方法：利用电泳法初步确定PEG-TCS的分子量、用质谱法进行验证；通过TNBS 法和荧光胺法测定其修饰度。结果：从质谱法和电泳法可知PEG-TCS的理论修饰度为9.0909%，TNBS法测得的修饰度为9.8613%%，荧光胺法所测得值为8.5955%。TNBS法测定结果尽管偏大，但是操作简单，不需要专门的仪器；荧光胺法需要荧光分光光度计，且丙酮易挥发。结论：TNBS 法可作为测定PEG-TCS 修饰度的方法。
关键词：修饰度;聚乙二醇化天花粉蛋白;TNBS;荧光胺
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