焦测序技术的研究进展
Late-PCR技术,高灵敏度,微流控芯片
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陈之遥 周国华 中国药科大学;
【摘要】焦测序技术是一种实时DNA测序技术。它在DNA聚合酶、三磷酸腺苷硫酸化酶、荧光素酶和三磷酸腺苷双磷酸酶4种酶的协同作用下,将焦磷酸转化为等量的荧光信号,通过荧光信号的高低实时检测待测序列,操作简便,可实现高通量、自动化测定,检测不需要电泳,不需要对样品标记和染色,结果准确可靠重复性好。本文综述了焦测序技术的基本原理、历史及其在测序模板制备技术、反应体系和检测仪器三个方面的最新进展,并重点介绍制备单链的Late-PCR技术、高灵敏度反应体系的获得以及454公司超高通量测序技术,并对焦测序技术的发展做了展望。
【关键词】 焦测序 Late-PCR技术 高灵敏度 微流控芯片
【分类号】Q503
月吐舀DNA序列测定技术是现代生命科学研究的核心技术之一。目前普遍使用的DNA序列分析技术基本都是基于双脱氧核昔酸链终止法(Sanger法)，但Sanger法只能定性不能定一量;适合大规模测序不适合测定单碱基差异并且不能准确测定引物后面的碱基序列焦测序(pyrosequencing)技术在
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摘要：焦测序技术是一种实时DNA 测序技术。它在DNA聚合酶、三磷酸腺苷硫酸化酶、荧光素酶和三磷酸腺苷双磷酸酶4 种酶的协同作用下，将焦磷酸转化为等量的荧光信号，通过荧光信号的高低实时检测待测序列，操作简便，可实现高通量、自动化测定，检测不需要电泳，不需要对样品标记和染色，结果准确可靠重复性好。本文综述了焦测序技术的基本原理、历史及其在测序模板制备技术、反应体系和检测仪器三个方面的最新进展，并重点介绍制备单链的Late-PCR 技术、高灵敏度反应体系的获得以及454公司超高通量测序技术，并对焦测序技术的发展做了展望。
关键词：焦测序；Late-PCR 技术；高灵敏度；微流控芯片
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