甲胎蛋白和癌胚抗原的胶体金免疫层析同步检测
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韩继美 方菲 朱龙章 叶明强 赵露晶 沈鹤柏 上海师范大学生命与环境科学学院;
【摘要】目的:探讨建立一种同时快速检测甲胎蛋白(AFP)和癌胚抗原(CEA)两种肿瘤标志物的方法。方法:用胶体金分别标记鼠抗AFP单克隆抗体和鼠抗CEA单克隆抗体,喷于胶金垫上,与之配对的抗体喷在硝酸纤维素膜(NC膜)上分别做检测线T2和T1,兔抗鼠二抗喷在NC膜上做质控线,利用免疫层析技术进行检测。结果:采用Frens方法制备的胶体金粒径在20 nm,紫外可见吸收峰在521 nm处,金标抗体的最适pH在9.0,最适抗体量为200μl,胶体金标记2.4μg抗体。测试结果表明同时检测AFP和CEA的试纸条灵敏度分别为20 ng.mL-1和5 ng.mL-1,检测时间仅需10 min,与PSA、CA125、CA15-3、Ferritin、Human Albumin等没有交叉反应,稳定性好。结论:应用胶体金免疫层析技术,实现了AFP和CEA的同步检测。
【关键词】 胶体金 免疫层析 甲胎蛋白 癌胚抗原
【基金】上海市教委重点项目(07zz65) 上海市科委项目(0752nm028)
【分类号】R446.6
前言肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是我国常见的恶性肿瘤之一。近年来,HCC的死亡率已上升到恶性肿瘤死亡率的第二位[1,2]。甲胎蛋白(alpha-fetoprotein,AFP)是一种由胎儿肝细胞产生的分子量70 kDa左右的胚胎性糖蛋白[3],出生后其含量迅速降低,正常人血液中其含量
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摘要 目的：探讨建立一种同时快速检测甲胎蛋白(AFP)和癌胚抗原(CEA)两种肿瘤标志物的方法。方法：用胶体金分别标记鼠抗AFP单克隆抗体和鼠抗CEA单克隆抗体，喷于胶金垫上，与之配对的抗体喷在硝酸纤维素膜(NC膜)上分别做检测线T2和T1，兔抗鼠二抗喷在NC膜上做质控线，利用免疫层析技术进行检测。结果：采用Frens方法制备的胶体金粒径在20nm，紫外可见吸收峰在521nm处，金标抗体的最适pH在9.0，最适抗体量为200μl，胶体会标记2.4μg抗体。测试结果表明同时检测AFP和CEA的试纸条灵敏度分别为20ng·mL-1和5ng·mL-1，检测时间仅需10min，与PSA、CA125、CA15-3、Ferritin、Human Alburain等没有交叉反应，稳定性好。结论：应用胶体金免疫层析技术，实现了AFP和CEA的同步检测。
关键词：胶体金；免疫层析；甲胎蛋白；癌胚抗原
中图分类号：R735.7，P092 文献标识码：A 文章编号：1673-6273(2009)04-726-04
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