牛奶中金黄色葡萄球菌PCR检测方法的建立与应用
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吕艳 王华 王君玮 徐天刚 王淑娟 赵永刚 王志亮 中国动物卫生与流行病学中心国家外来动物疫病诊断中心ABL-3实验室;
【摘要】目的:建立一种直接从牛奶中检测金黄色葡萄球菌的PCR快速诊断方法。方法:根据已发表的金黄色葡萄球菌16-23SrRNA特异性序列设计并合成一对引物,通过优化反应条件建立从牛奶中直接检测金黄色葡萄球菌的PCR方法。结果:与细菌的常规分离方法相比,PCR法敏感性高,与其它型葡萄球菌无交叉反应,特异性达100%,检测细菌基因组DNA最低浓度为35ng/μL,能在5h内对送检的牛奶样品直接进行金黄色葡萄球菌的测定,可用于乳制品中金黄色葡萄球菌的检测。结论:成功建立了快速检测牛奶中金黄色葡萄球菌PCR方法。
【关键词】 金黄色葡萄球菌 鉴定 牛奶 聚合酶链反应
【基金】农业部产业技术资助MATS(2060302) 国家“十五”攻关计划项目(2006BAD06A13)
【分类号】R155
前言乳房炎是影响世界奶牛产业经济的重要疾病之一,导致产奶量和产奶质量下降,用药物治疗后增加成本,同时劣质牛奶质量下降不能饮用,发病严重的将被淘汰。因此对发病的奶牛进行确诊,并快速鉴定出病原体非常重要,但需要依靠实验室诊断。微生物学方法是鉴定牛奶中病原菌的“金
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摘要 目的：建立一种直接从牛奶中检测金黄色葡萄球菌的PCR快速诊断方法。方法：根据已发表的金黄色葡萄球菌16-23S rRNA特异性序列设计并合成一对引物，通过优化反应条件建立从牛奶中直接检测金黄色葡萄球菌的PCR方法。结果：与细菌的常规分离方法相比，PCR法敏感性高，与其它型葡萄球菌无交叉反应，特异性达100%，检测细菌基因组DNA最低浓度为35ng/μL，能在5h内对送检的牛奶样品直接进行金黄色葡萄球菌的测定，可用于乳制品中金黄色葡萄球菌的检测。结论：成功建立了快速检测牛奶中金黄色葡萄球菌PCR方法。
关键词：金黄色葡萄球菌；鉴定；牛奶；聚合酶链反应
中图分类号：R37，S852.611 文献标识码：A 文章编号：1673-6273(2009)05-931-03
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