新城疫液相芯片快速检测方法的建立
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詹爱军 王新卫 金鑫 花群义 卢体康 陈枝楠 秦爱建 扬州大学兽医学院;深圳出入境检验检疫局动植物检验检疫技术中心;河南农业大学牧医工程学院;
【摘要】目的:建立可检测新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)的液相芯片快速检测技术。方法:用DNAStar软件对GEN-BANK中NDV的NP基因进行序列分析设计NDV特异性探针并标记生物素,利用该探针与荧光编码微球偶联后与抽提的NDV病毒RNA的RT-PCR产物杂交反应,用液相芯片检测仪(Liquichip 200)检测荧光信号建立了NDV快速液相芯片检测方法。结果:检测结果显示,该法具有较好的特异性,不与H5AIV和H9AIV反应;检测灵敏度达到150个EID50;该法与鸡胚病毒分离法检出NDV的符合率达到97.1%。结论:初步建立了检测NDV的液相芯片技术,为进一步搭建NDV全新快速高通量检测平台奠定了基础,也为其他同类病毒的快速高通量检测提供了借鉴和经验。
【关键词】 新城疫病毒 液相芯片 检测
【基金】“十一五”国家科技支撑项目(2006BAK20A29) 深圳出入境检验检疫局科技项目(SZ2008102)资助
【分类号】S858.31
前言鸡新城疫是严重危害养鸡业的重要疫病之一,可造成很大的经济损失。鸡新城疫检测方法包括传统方法与分子生物学方法[1-3],前者如病毒分离培养和血清学诊断等方法操作繁琐、诊断时间长等,而分子生物学方法如RT-PCR等具有特异、敏感、简便快捷等特点,克服了传统方法的局限性
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摘要 目的：建立可检测新城疫病毒(Newcaslte disease virus，NDV)的液相芯片快速检测技术。方法：用DNAStar软件对GEN-BANK中NDV的NP基因进行序列分析设计NDV特异性探针并标记生物素，利用该探针与荧光编码微球偶联后与抽提的NDV病毒RNA的RT-PCR产物杂交反应，用液相芯片检测仪(Liquicbip 200)检测荧光信号建立了NDV快速液相芯片检测方法。结果：检测结果显示，该法具有较好的特异性，不与H5AIV和H9 AIV反应；检测灵敏度达到150个EID50；该法与鸡胚病毒分离法检出NDV的符合率达到97.1%。结论：初步建立了检测NDV的液相芯片技术，为进一步搭建NDV全新快速高通量检测平台奠定了基础，也为其他同类病毒的快速高通量检测提供了借鉴和经验。
关键词：新城疫病毒；液相芯片；检测
中图分类号：S855.3 文献标识码：A 文章编号：1673—6273(2009)15—2903—04
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