转染Netrin-1基因的真皮多能干细胞治疗大鼠脊髓损伤的研究
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陈景祥 王国华 任小宝 王涛 孙溦 屈纪富 第三军医大学西南医院急诊科;解放军第154医院内三科;第三军医大学西南医院重症医学科;
【摘要】目的:观察转染Netrin-1基因的真皮多能干细胞(dMSCs)移植对大鼠脊髓损伤的修复作用。方法:取大鼠真皮组织,分离培养真皮多能干细胞,经转染Netrin-1基因和诱导,观察细胞形态变化,免疫细胞化学方法对分化细胞进行鉴定。Wistar大鼠在L4水平制成脊髓全横断损伤模型,伤处移植大鼠真皮多能干细胞或者转染Netrin-1基因的真皮多能干细胞。对大鼠进行动物行为学(BBB)评分和对损伤脊髓进行组织学检测。结果:转染Netrin-1基因的dMSCs诱导产生的神经元样细胞占总细胞数的比例为24.45±3.73%,而单独的真皮多能干细胞诱导产生的神经元样细胞占总细胞数的比例10.50±2.13%,二者差异显著(P0.05)。BBB评分显示转染Netrin-1基因的dMSCs移植组明显高于单纯dMSCs移植组和空白对照组(P0.05);转染Netrin-1基因的dMSCs移植组损伤脊髓结构的修复明显优于单纯dMSCs移植组和空白对照组。结论:转染Netrin-1基因的真皮多能干细胞移植较单纯dMSCs移植对大鼠脊髓损伤有更好的治疗作用。
【关键词】 Netrin- 真皮多能干细胞 脊髓损伤
【基金】重庆市自然科学基金计划项目(CSTC,2007BB5040)
【分类号】R651.2
前言在脊髓损伤的修复过程中,神经细胞再生能力不足是影响其功能恢复的关键。将有活性的具有成神经分化潜能的种子细胞移植用于治疗脊髓损伤,有助于损伤轴突修复、再生和恢复神经功能[1]。真皮多能干细胞(dMSCs)是一种具有高度增殖力和多向分化潜能的间充质干细胞,具有分化为
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前言
在脊髓损伤的修复过程中，神经细胞再生能力不足是影响其功能恢复的关键。将有活性的具有成神经分化潜能的种子细胞移植用于治疗脊髓损伤，有助于损伤轴突修复、再生和恢复神经功能。真皮多能干细胞(dMscs)是一种具有高度增殖力和多向分化潜能的间充质干细胞，具有分化为神经巢蛋白(Nestin，神经干细胞的标志之一)阳性细胞的能力，可能是脊髓损伤时细胞移植治疗较为理想的种子细胞。脊髓损伤时局部微环境缺血缺氧、神经营养因子不足等可影响移植细胞存活和增殖，损伤脊髓功能不能有效修复。Netrin-1既是一种重要的轴突导向分子，又是一种重要的促血管生长因子。因此，本研究拟将Netrin-1基因转染大鼠真皮多能干细胞，筛选高表达外源性Netrin-1基因的真皮多能干细胞，诱导其分化为神经干细胞，移植入脊髓损伤大鼠，观察脊髓损伤部位的修复情况，为脊髓损伤治疗提供实验依据。
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