hKCNQ1/hKCNQ2嵌合体的构建,表达及电生理学特性
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王平安 李小青 刘艳 张清挺 徐舒 东南大学医学院;
【摘要】目的:构建hKCNQ1/hKCNQ2嵌合体,研究嵌合体通道的电生理学特征,为分析PIP2对hKcnq1通道的调节机制打下基础。方法:利用over-lap PCR方法构建hKCNQ1/hKCNQ2嵌合体质粒(Q1ctQ2-pCI、Q1ctQ2-pcDNA3.1),转染HEK293细胞,采用全细胞膜片钳技术记录HEK293细胞上嵌合体电流。结果:在全细胞膜片钳记录模式下,转染了嵌合体Q1ctQ2-pCI的HEK293细胞电流密度I60为5.2±0.87pA/pf,其半数激活电压V0.5为23.3±8.9mV(n=6);转染了嵌合体Q2ctQ1-pcDNA3.1的HEK293细胞电流密度I60为21.7±4.2pA/pf,其半数激活电压V0.5为-37.5±3.6mV(n=9)。结论:成功构建了hKCNQ1/hKCNQ2嵌合体并完成了嵌合体重组质粒的异源性表达和膜片钳记录。
【关键词】 质粒构建 嵌合体 膜片钳
【分类号】R33-33
前言Kcnq1(Kv7.1)是电压依赖性钾通道,在心脏、内耳等多个器官中有丰富表达[1],参与完成这些器官的不同生理功能。KCNQ1基因剔除小鼠可出现耳聋、致命性心律失常以及胃肠道形态发育异常等症状[2-4]。可见,Kcnq1通道对于机体正常生命活动的维持具有重要作用。该通道的组成及功
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前言
Kcnq1(Kv7.1)是电压依赖性钾通道，在心脏、内耳等多个器官中有丰富表达，参与完成这些器官的不同生理功能。KCNQ1基因剔除小鼠可出现耳聋、致命性心律失常以及胃肠道形态发育异常等症状。可见，Kcnq1通道对于机体正常生命活动的维持具有重要作用。该通道的组成及功能调控机制一直是相关领域的研究热点。
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