神经干细胞三维空间壳聚糖生物材料中培养
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熊轶 张巨峰 刘文丽 深圳北京大学香港科技大学医学中心;
【摘要】目的:体外培养神经干细胞,并将其种植在三维空间壳聚糖材料中,体外培养一段时间,使壳聚糖材料内尽量分布足够多的细胞。方法:将NSCs种植在4不同孔径直径16通道壳聚糖材料中,分别培养7d和14d。DAPI标记细胞,荧光镜下观察细胞在不同孔径直径材料中的分布。MTT法检测不同孔径直径壳聚糖材料内细胞的活性。结果:DAPI荧光显示,培养7d时,细胞仍然成团贴附在材料的通道内,少有细胞迁移至壳聚糖材料内,而培养14d可见细胞较均匀的分布在材料内,同时观察到,孔径直径为0-75μm和75-125μm两种壳聚糖材料,容纳细胞数较孔径直径为125-200μm和200-300μm少。MTT结果显示,200-300μm孔径直径的壳聚糖材料内细胞活性为各组最高,间接提示其内所含细胞数最多,而培养7d和14d两种培养方式对同种孔径直径材料内所含细胞数并无影响。结论:壳聚糖可降解生物材料能显示出良好生物相容性;体外培养NSCs于孔径为200-300μm的壳聚糖材料内14d,其存活细胞多且分布较均匀。
【关键词】 神经干细胞 壳聚糖 MTT
【基金】国家自然科学基金(30900774) 深港创新圈项目(08fz-08) 中国博士后基金(20090460788)
【分类号】Q813
前言神经干细胞(neural stem cells,NSCs)是一种未分化、多潜能、具有自我更新能力的前体细胞,它的子细胞能够分化产生神经系统的各类细胞,且经过多次分裂后仍能稳定地保持自身的特性。虽然NSCs在治疗脊髓损伤方面给我们展示了很好的前景,但随着研究的深入,发现NSCs在传统的
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摘 要 目的：体外培养神经干细胞，并将其种植在三维空间壳聚糖材料中，体外培养一段时间，使壳聚糖材料内尽量分布足够多的细胞。方法：将NSCs种植在4不同孔径直径16通道壳聚糖材料中，分别培养7d和14d。DAPI标记细胞，荧光镜下观察细胞在不同孔径直径材料中的分布。MTT法检测不同孔径直径壳聚糖材料内细胞的活性。结果：DAPI荧光显示，培养7d时，细胞仍然成团贴附在材料的通道内，少有细胞迁移至壳聚糖材料内，而培养14d可见细胞较均匀的分布在材料内，同时观察到，孔径直径为0-75μm和75—125μm两种壳聚糖材料，容纳细胞数较孔径直径为125-200U m和200-300μm少。MTT结果显示，200-300μm孔径直径的壳聚糖材料内细胞活性为各组最高，间接提示其内所舍细胞数最多，而培养7d和14d两种培养方式对同种孔径直径材料内所含细胞数并无影响。结论：壳聚糖可降解生物材料能显示出良好生物相容性；体外培养NSCs于孔径为200-300μm的壳聚糖材料内14d，其存活细胞多且分布较均匀。
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