胎膜来源的间充质干细胞促进烧伤愈合的研究
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刘雄昊 戴国胜 冯劢 赵凯 吴奔 杨俊林 胡友金 李卓 薛金锋 邬玲仟 梁德生 中南大学医学遗传学国家重点实验室;
【摘要】目的:研究胎膜来源的间充质干细胞在治疗SD大鼠Ⅲ度烧伤中的作用。方法:用胰酶消化法分离足月产胎膜细胞,加入Amino-MAXⅡ培养基进行培养。流式细胞仪检测细胞表面标志物CD29、CD73、CD14、CD45。分别用浓度为3mg/ml、5mg/ml、7mg/ml、9mg/ml的明胶溶液包被脱细胞真皮(ADM),以5×106/ml的密度将细胞种植在包被和未包被的ADM表面,2小时后收集未贴附在ADM上的细胞,计算细胞种植效率。实验组:以7mg/ml的明胶包被ADM,以5×106/ml的密度种植第2～3代细胞,培养3～5天后,移植至SD大鼠Ⅲ度烧伤创面;对照组Ⅰ移植单纯的ADM,对照组Ⅱ未进行移植,术后定期观察创面大体情况,计算创面收缩率、表皮再生面积比例,第5周切取新生皮肤组织行HE染色。结果:胎膜分离的细胞以长梭形为主,表达与间充质干细胞相关的表面抗原标志物CD29、CD73,极少表达造血细胞标志物CD14、CD45。不同浓度明胶溶液包被和未包被的ADM,其细胞种植效率均无明显区别(P0.05);相比对照组,实验组移植物成活时间更长,创面再上皮化时间较早,创面收缩率较小,再生表皮面积亦较多(P0.05);再生表皮更厚,有明显的表皮突,真皮层毛细血管丰富。结论:成功分离、培养了胎膜来源的间充质干细胞。胎膜来源间充质干细胞复合ADM可促进SD大鼠Ⅲ烧伤创面表皮再生,加速创伤愈合,抑制创面收缩。
【关键词】 胎膜 间充质干细胞 脱细胞异体真皮 烧伤治疗 皮肤组织工程
【基金】国家重点基础研究发展计划(2010CB529903) 国家高技术研究发展计划(2007AA021002和2007AA021206) 国家自然科学基金(30700458和30971298)
【分类号】R644
前言在烧伤患者尤其是大面积烧伤患者的皮肤移植过程中所需的自体皮源很有限,而异体或异种皮移植又存在排异反应,难以满足临床需要。国内外已有学者尝试将骨髓来源的间充质干细胞用于烧伤的治疗[1-3]。间充质干细胞(Mesenchymal stemcell,MSC)是一类具有多向分化潜能的组织干
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前言
在烧伤患者尤其是大面积烧伤患者的皮肤移植过程中所需的自体皮源很有限，而异体或异种皮移植又存在排异反应，难以满足临床需要。国内外已有学者尝试将骨髓来源的间充质干细胞用于烧伤的治疗㈣。间充质干细胞(Mesenchymal stem cell，MSC)是一类具有多向分化潜能的组织干细胞，最早在骨髓中发现。在体外特定的诱导条件下，MSC可以分化为骨、软骨、脂肪、肌腱、肌肉、神经等多种细胞。MSC因其具有来源广泛、多向分化潜能、免疫原性低等特点而成为近年来的研究热点之一。人胎膜由羊膜和绒毛膜组成，人胎膜中除含有滋养层细胞外，还含有丰富的血管和间充质成分。有学者认为，人胎膜组织中存在具有间质干细胞特性的细胞。本研究应用胎膜来源的间充质干细胞复合脱细胞异体真皮(ADM)，移植至SD大鼠Ⅲ烧伤创面，以探讨胎膜来源的间充质干细胞在烧伤治疗中的应用价值。
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