李文娟，冯震，薛晓敏，黄静，吴自荣

    γ-聚谷氨酸天冬氨酸-顺铂复合物的制备及其生物活性

    李文娟，冯震，薛晓敏，黄静，吴自荣

    200062 上海，华东师范大学生命科学学院

    研究一种低毒性的顺铂复合物：γ-聚谷氨酸天冬氨酸-顺铂复合物(γ-PGAasp-CDDP)，考察其体外性质和体内毒性，并探讨可能的作用机制。

    γ-聚谷氨酸与天冬氨酸发生酰胺化反应制备 γ-聚谷氨酸-天冬氨酸复合物，核磁共振对其结构进行表征；化学法制备 γ-聚谷氨酸天冬氨酸-顺铂复合物；常规方法检测该复合物稳定性；透析法研究药物缓释效果；MTT 法检测复合物体外抗肿瘤细胞活性；流式细胞仪检测其对细胞凋亡的作用；小鼠体内实验检测其体内毒性。

    成功制备γ-聚谷氨酸天冬氨酸-顺铂复合物，顺铂的有效结合率达 30%；该复合物在常温中性环境下稳定；30 h 时顺铂的累计释放率达到 30%；细胞实验表明复合物对 Bcap-37(人乳腺癌细胞)和 BEL7404(人肝癌细胞)具有显著的杀伤作用，小鼠体内实验表明该复合物的毒性比游离顺铂低。

    γ-聚谷氨酸天冬氨酸-顺铂复合物仍然保留了游离顺铂的生物活性，在杀伤肿瘤细胞、引起细胞凋亡的同时，大大降低了体内毒副作用，其作用机制可能与实体瘤组织的高通透性、滞留效应(EPR 效应)以及药物缓释作用有关，因此该复合物具有潜在的临床应用价值。

    药物载体； 药物释放系统； 顺铂； γ-聚谷氨酸-天冬氨酸

    恶性肿瘤是当前严重影响人类健康的主要疾病之一，顺铂[cis-dichlorodiammineplatinum(II)，CDDP]类配合物是目前应用最为广泛的抗肿瘤药物，但因其具有严重的毒副作用，限制了临床应用[1]。将抗肿瘤药物载于高分子载体上，靶向性输送到肿瘤组织(即被动靶向)[2]，极大地提高了药物的生物利用率，有效地降低药物的毒副作用并提高用药剂量，是目前药物释放领域研究的热点之一，国外报道的有微球体、纳米微粒、脂质体和微型胶囊等[3-7]。本实验室曾以γ-聚谷氨酸作为载体连接顺铂，制备聚谷氨酸-顺铂复合物，并取得较好的结果[8]。但是仅以小分子γ-聚谷氨酸作为载体还存在载药量低和载体用量大的缺点，本文采用了一种连接效率更高的新型药物载体：γ-聚谷氨酸-天冬氨酸，利用其活性基团羧基连接顺铂，制备γ-聚谷氨酸天冬氨酸-顺铂复合物，并对其体内外性质进行研究。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 主要试剂 H-Asp(OtBu)-OtBu·HCl(Asp ......