王苗，董坚，李秋恬，吕加令，武治国，毛剑锋

    作者单位：650032 昆明医学院第一附属医院生物治疗中心

    植物中药IHA-01抑制人肺癌GLC细胞增殖和诱导凋亡的实验研究

    王苗，董坚，李秋恬，吕加令，武治国，毛剑锋

    650032 昆明医学院第一附属医院生物治疗中心

    初步探讨植物中药 IHA-01 抑制人肺癌 GLC 细胞增殖及诱导其早期凋亡的作用。

    人肺癌 GLC 细胞经不同浓度(0.01、0.1、1、10、100 μg/ml)IHA-01 作用24、48、72 h，以MTT 法进行 IHA-01 有效作用浓度筛选并确定IHA-01 工作浓度(1/2 IC50)；透射电镜观察 IHA-01 细胞超微结构；流式细胞术进行 DNA 倍体分析和 TUNEL 分析，检测 IHA-01 对肺癌 GLC 细胞周期及早期凋亡的影响。

    IHA-01 工作浓度(1/2 IC50)为 0.7 μg/ml，且不同浓度 IHA-01 作用不同时间对 GLC 细胞增殖的抑制作用呈时效和量效依赖关系；透射电镜发现 IHA-01 实验组部分细胞出现细胞连接消失，微绒毛消失，胞质密度增加，可见细胞早期凋亡改变，具有诱导细胞分化和早期凋亡的作用；流式细胞术显示肺癌 GLC 细胞出现明显的凋亡峰，细胞周期阻滞在 G0/G1期，S 期细胞减少；流式细胞术 TUNEL 法检测结果显示，细胞凋亡和坏死同时存在。

    IHA-01 具有抑制肺癌 GLC 细胞增殖，诱导凋亡的作用，具有深入研究的价值。

    中草药； 肺肿瘤； 细胞增殖； 细胞凋亡

    许多抗癌药物可以诱导癌细胞向终末阶段分化、重新启动细胞凋亡程序，从而抑制肿瘤细胞增殖，自主清除恶变的细胞，达到抑制肿瘤生长的目的[1]。天然植物新药 IHA-01 是从云南一种天然植物提取物中精制出的抗肿瘤活性成分水朝阳内酯，具有活血祛瘀、消肿散结之功效。云南民间用其治疗消化道癌、肺癌、乳腺癌等[2-3]，但尚未见科学报道。在以抑制肿瘤细胞增殖活性为指标进行体外抗肿瘤谱筛选时，我们发现 IHA-01 对多种肿瘤细胞株具有较强的杀伤能力。在此基础上，本研究以人肺癌 GLC 肿瘤细胞株为研究对象，初步探讨 IHA-01 抑制人肺癌 GLC 细胞增殖和诱导凋亡的作用。

    1 材料和方法

    1.1 材料

    1.1.1 试剂 RPMI1640 培养基购自美国 Gibco 公司；新生牛血清(NBCS)购自杭州四季青生物工程材料有限公司；依托泊苷(VP16)购自江苏恒瑞医药股份有限公司；十二烷基硫酸钠(SDS)、乙二胺四乙酸二钠(EDTA)均为上海生工生物工程技术服务有限公司产品；流式 TUNNEL 试剂盒为美国 Backman Coulter 公司产品；IHA-01 由本课题组委托中科院昆明植物所提取 ......