司磊，赵岐刚，刘朝阳，张伟

    慢病毒靶向携带survivin-siRNA抗肺腺癌裸鼠体内研究

    司磊，赵岐刚，刘朝阳，张伟

    252000 山东，聊城市人民医院检验科(司磊、赵岐刚)；100021 北京，中国医学科学院中国协和医科大学肿瘤研究所肿瘤医院检测中心(刘朝阳、张伟)

    探讨慢病毒载体介导 survivin-siRNA 对人肺腺癌裸鼠移植瘤的体内抑瘤活性。

    参考 siRNA 的设计策略，构建表达survivin-siRNA 的慢病毒载体；于各 BALB/C 裸鼠右侧腋窝皮下接种人肺腺癌 A549 细胞悬液，构建人肺腺癌A549 细胞裸鼠移植瘤模型，肿瘤组织局部注射 survivin-siRNA 的慢病毒载体，观察肿瘤的体积及随时间变化的生长曲线；通过碘化丙啶(propidium iodide，PI)染色检测细胞凋亡情况；流式细胞术检测肿瘤细胞周期变化。

    慢病毒载体介导 survivin-siRNA 对裸鼠人肺腺癌 A549 的抑瘤率为 46.07%；经过 PI 和 Annexin-V 染色区分凋亡早晚期的细胞为30% ~ 35%，荧光显微镜下观察肿瘤细胞凋亡；G1 期细胞比例明显增加，S 期细胞比例则明显减少。

    慢病毒载体介导的 siRNA 能有效抑制裸鼠移植人肺腺癌 A549 的 survivin 基因的表达，有效激发细胞凋亡。

    RNA，小分子干扰； 遗传载体； 慢病毒属； 肿瘤，实验性； 生存素

    RNAi 技术又称为转录后基因沉默，近年来国内外诸多研究人员就 RNAi 技术用于临床治疗方面给予了肯定[1-2]，如果利用 RNAi 的基因沉默作用抑制体内原癌基因的激活，肿瘤的发生率就会降低，甚至可以永久地避免相关肿瘤的发生[3]。

    生存素(survivin)在多数恶性肿瘤组织中表达丰富且与预后不良相关，正常成人组织不表达，这种选择性表达的特性受到瞩目[4]，并已成为目前恶性肿瘤基因诊断和治疗的新靶点。survivin 是 caspase-3 和 caspase-7 的直接抑制剂，从而阻断凋亡过程。同时，survivin 通过细胞周期依赖性表达，可对抗 G2/M 期凋亡的诱导，其在肿瘤细胞中的过度表达可克服凋亡的关卡，通过有丝分裂促进转化细胞的异常增殖[5]。由于几乎所有人类肿瘤中都有survivin 表达，可拮抗由Fas、Bax、caspase-3、caspase-7 和抗癌药物诱导的细胞凋亡[6]，从而促进细胞增生或影响抗癌药物的治疗效果。抑制肿瘤细胞增殖和诱导肿瘤细胞凋亡是肿瘤治疗的 2 个重要指标 ......