李科，刘健，任红英，蒋鑫

    脑卒中是临床常见的神经系统急症之一，以高病死率、高致残率为主要特点，抢救生命与脑功能的保护是治疗重点，可是到目前为止，治疗这类患者的手段还是乏善可陈。近几年，随着对脑卒中病理生理研究的进展，人们研究的焦点逐渐集中于如何减少脑卒中患者继发炎症反应致脑神经细胞凋亡。白细胞介素-10(IL-10)是目前研究较多的一种抗炎因子，目前认为 IL-10 能通过抑制肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和其他前炎性细胞因子的产生减轻缺血后脑损伤，有利于神经元的修复和存活，在脑缺血中有神经保护作用[1]。

    1 材料与方法

    1.1 主要试剂和仪器

    36 只 6～8 周成年 SD 雄鼠，清洁级，体重200～250 g，实验动物由岭南实验动物中心提供。兔抗大鼠 p53AIP1 抗体为英国 Abcam 公司产品；羊抗兔 HRG 标记二抗为美国 SANTA Crus公司产品；重组大鼠白细胞介素-10(rrIL-10)为英国 Peprotech EC 公司产品；总蛋白提取试剂盒为北京普利莱公司产品；Tunel 法凋亡检测试剂盒为美国默克公司产品(目录号：QIA39)；SDS-PAGE胶配制试剂盒为北京碧云天公司产品；HRP 标记的GAPDH 内参抗体为上海康成生物工程有限公司产品；26 号尼龙线栓为北京沙东生物技术有限公司产品；浓缩多聚赖氨酸为广州威佳公司产品。

    1.2 方法

    1.2.1 大鼠脑梗死再灌注模型的构建 36 只大鼠随机抽取 6 只作为假手术组，其余 30 只为手术组。大鼠禁食 12 h 与禁水 6 h 后，氯胺酮100 mg/kg 大鼠肌肉注射麻醉。采用改良 MCAO(middle cerebral artery occlusion)法[2]，将预先经多聚赖氨酸浸渍，60 ℃ 烘干处理过的直径为 0.26 mm的线栓经大鼠右侧颈内动脉(carotid artery，CA)置入约 18～22 mm(根据动物大小调整插入线栓的深度)，阻塞右侧大脑中动脉，记录梗阻开始时间，固定外端的线栓并标记留在皮肤外面线栓的长度，缝合皮肤。大鼠麻醉未苏醒时注意保暖。缺血 2 h后，拔出线栓约 10 mm，使线栓退至颈总动脉杈处，实现脑缺血再灌注。

    1.2.2 动物模型评分 动物模型评分标准(Zea longa评分标准)[2]如下：

    0 分：无神经缺损症状，活动正常；

    1 分：不能完全伸展对侧前肢(轻度局灶性神经功能缺损)； ......