蒋光，杨远

    支气管哮喘是气道慢性炎症性疾病，反复炎症刺激可引起组织损伤及后续的组织结构的改变即气道重塑[1]，其确切发生机制尚不十分清楚。糖原合成酶激酶 3β(glycogen synthase kinase3β，GSK-3β)是真核生物中广泛存在的丝/苏氨酸蛋白激酶，参与多种细胞过程和信号转导途径，可以参与核因子 kappa B(nuclear factor-kappa B，NF-κB)信号通路的调节。文献[2]报道 GSK3β 主要通过调节 NF-κB 核转位及亚基 p65 磷酸化而影响核因子的活性，而 NF-κB又是多向调节功能的转录因子，广泛参与许多基因的转录调控，包括基质金属蛋白酶 9(matrix metalloprotease-9，MMP-9)基因[3]，是重要的炎症反应调节因子，它们在许多疾病生理病理过程中起重要作用，近年研究发现GSK-3β 具有逆向调节心肌肥厚[4]、气道平滑肌肥大增生[5]的作用，Bentley 等[6]发现急性支气管哮喘模型的气道平滑肌细胞肥大、增生，上皮细胞和炎症细胞中失活的磷酸化 GSK-3β(pGSK-3β)含量增加。全肺 pGSK-3β 增加，GSK-3β 活性降低，说明 GSK-3β 磷酸化、失活促进气道平滑肌重塑。有关 GSK-3β 在慢性哮喘气道重塑过程中的表达及作用尚不清楚。本实验旨在利用卵蛋白致敏和激发的慢性支气管哮喘小鼠模型，探讨支气管哮喘气道重塑形成过程中 GSK-3β、NF-κB 和mmP-9 的表达情况及相互关系，为气道重塑的发生机制提供新的理论依据。

    1 材料与方法

    1.1 主要试剂和仪器

    清洁级雄性 BALB/c 小鼠 16 只，6 周龄，体重 16～20 g，许可证号：SCXK(苏)2007-0001，购于扬州大学比较医学中心；V 级鸡卵清蛋白(ovalbumin，OVA)购自美国 Sigma 公司；兔抗磷酸化糖原合成酶激酶-3β(Ser9)多克隆抗体购自美国 Cell signal 公司；鼠抗 NF-κB p65 单克隆抗体购自美国 Santa Cruz 公司；兔抗mmP-9 多克隆抗体购自美国 Santa Cruz 公司；β-actin 购自美国 Santa Cruz 公司 ......