陈岚，车红，任丽丽，王健伟

    ·论著·

    用安德森空气生物采样器采集病毒气溶胶的研究

    陈岚*，车红*，任丽丽，王健伟

    【摘要】

    目的以表达绿色荧光蛋白(GFP)报告基因的重组腺病毒(rAdvGFP)为模式病毒，进行气溶胶的主动发生实验和模拟剧烈吹打、振荡混匀等操作，利用安德森采样器进行气溶胶的采集，以建立简单易行的病毒气溶胶采集检测体系。

    方法用气溶胶发生器模拟模式病毒的气溶胶主动发生，分别在距离发生器管口 0、10 和 20 cm 处放置采样器及培养皿，在气溶胶发生 30 s 时开始采集，共采集 5 min。在模拟吹打操作中，将 10 ml 病毒液置于 50 ml 离心管中，用微量移液器反复吸取吹打病毒液；在模拟振荡操作中，将10 ml 病毒液置于 50 ml 离心管中盖紧，以振荡器最大速度涡旋振荡 1 min，立即打开管盖采集 2 min，然后盖紧再重复振荡 30 s 后开盖继续采集。两种模拟操作均在距离管口 0 和 10 cm 处放置采样器及培养皿，各采集 5 min。收集各采样器及培养皿中的液体，利用阳离子聚合物聚凝胺浓缩后用 PCR 方法检测病毒核酸，并接种人胚肾 293 细胞进行病毒的培养，在荧光显微镜下观察 GFP 蛋白的表达。

    结果模拟气溶胶主动发生时，将置于距发生器管口 0、10和 20 cm 的采样器和培养皿中的采集液接种细胞均可观察到绿色荧光，并可检测到病毒核酸。模拟剧烈吹打时，置于0 cm 处的培养皿内可检测到病毒，而置于 0 cm、10 cm 处采样器和 10 cm 处培养皿中均未检测到病毒。在剧烈振荡模拟试验中，在距离管口 0 cm 的采样器和培养皿中均可检测到病毒，在置于 10 cm 处的采样器中未检测到病毒，在置于 10 cm 处的培养皿中可检测到病毒。

    结论利用 rAdvGFP 模式病毒和安德森采样器初步建立了病毒学实验气溶胶收集检测体系，对模拟危险操作感染性材料所产生的气溶胶做出危险评估，为制定病毒学实验操作规范提供了依据。

    【关键词】空气微生物学； 病毒学； 安全管理； 危险性评估； 生物气溶胶

    www.cmbp.net.cn 中国医药生物技术, 2010, 5(5):342-347

    气溶胶是由悬浮于气体介质中的固态或液态微小粒子形成的相对稳定的分散体系，其粒径一般为 0.001 ～ 100 μm[1]。悬浮于大气中的含有微生物或生物大分子等生命活性物质的固态或液态微粒称为生物气溶胶包括病毒、细菌、真菌、多肽、花粉等微生物[2] ......