袁捷，刘广鹏，韦敏，祁佐良，崔磊，曹谊林

    修复因创伤、感染、肿瘤等导致的下颌骨缺损是临床常见疾病，自体骨移植是目前疗效最佳的治疗手段，但因患者不但需承受自身供区的明显损伤，供区来源也受限，同时也存在创口感染、血肿形成、取骨区疼痛等诸多并发症[1-2]，所以在整复外科领域，目前下颌骨缺损的修复仍是难题。因此，寻找更好的下颌骨整复治疗方法备受关注。

    新兴的组织工程技术有很多优点，如良好恢复损伤组织正常结构和功能，支架材料可任意塑形且对供体部位损伤小，为修复下颌骨缺损提供了新的思路。所以应用组织工程技术修复承力下颌骨缺损是目前研究的热点。

    骨髓基质干细胞(bone marrow stromal cell，BMSC)已被证明是较好的种子细胞来源[3]。我们在前期已成功地应用成骨诱导 BMSC 分别复合珊瑚和珊瑚羟基磷灰石修复了犬下颌骨 3cm的节段缺损，与珊瑚组织工程骨相比，羟基磷灰石组织工程骨有较多材料残留，修复效果相对较差[4-6]。就组织工程的目的而言，希望支架最终能随新生组织的形成逐步降解，由此达到接近自然的良好修复。但珊瑚作为支架在组织工程骨内降解速率如何目前尚无定论。为此本实验分别采用成骨诱导 BMSC复合珊瑚构建组织工程骨修复犬下颌骨 3cm的标准节段缺损，通过观察比较此珊瑚组织工程骨在不同时间段支架材料降解情况确定其最终修复效果，为临床应用提供进一步的实验依据。

    1 材料与方法

    1.1 主要试剂和仪器

    地塞米松、β-磷酸甘油钠、2-磷酸抗坏血酸和DMEM 培养液购自美国 Sigma公司；杂交犬购自上海交通大学农学院；珊瑚为海南三亚产滨珊瑚。固定钛板、钛钉由常州康辉医疗器有限责任公司提供；μ80 显微 CT(Micro-CT)为瑞士 Scanco medical公司产品；AG-1(Ver.3.80)生物力学测试仪为日本 Shimdzu公司产品。

    1.2 方法

    1.2.1 BMSC的分离、诱导培养 5%的戊巴比妥钠(0.5ml/kg)麻醉 12只犬后，均抽取骨髓 3～4ml，PBS 洗涤，600×g 离心 5 min，去上层脂滴，4×104个有核细胞/cm2的密度接种于培养皿中，加含有地塞米松(10 nmol/L)、β-磷酸甘油钠(2.16 g/L)和2-磷酸抗坏血酸(37.5 mg/L)的成骨条件培养液，置37 ℃、5% CO2培养箱内培养。5d后PBS 洗去未贴壁细胞，更换培养液。待BMSC 大部分融合，0.25% 胰蛋白酶消化传代 ......