李韶菁，任晓，董悦生，张华，郑智慧，路新华，段海清

    卡斯帕酶-3(Caspase-3)作为最重要的成员和关键的执行分子，在凋亡信号传导的许多途径中发挥着重要的功能。许多常见病与多发病(病毒性感染例如感冒、关节炎等)、心脑血管疾病(例如脑卒中、心肌梗死等)、肿瘤、脑神经退行性疾病(例如早老性痴呆症、帕金森病等)的发生，都与卡斯帕酶-3的异常活动有关，因此，Caspase-3 被认为是一个很有前景的药物治疗靶位点。高效、高选择性的抑制剂将可能为治疗上述与Caspase-3相关的疾病提供新的途径[1-3]。

    目前国外一些大公司已竞相开展了此类药物的研发工作，其中，美国 Aventis公司和Vertex公司共同开发的治疗风湿性关节炎和脓血症的卡斯帕酶的抑制剂 VX740(Pralnacasan)和VX799 已完成 II 期临床研究；美国 Idun 制药公司开发的卡斯帕酶的抑制剂(代号：IDN6556和IDN6734)主要用于治疗急性心肌梗死，急性酒精中毒引起的肝衰竭；美国 Idun公司正在开发中的另一类卡斯帕酶的抑制剂 IDN5370 可预防缺血性脑卒中引起的脑神经元的大量死亡及由此引起的偏瘫和失语等后遗症[1]。我们以 Caspase-3 为靶点，建立了一个 Caspase-3 抑制剂的高通量筛选模型，应用此模型对微生物来源的共计 10026个次级代谢产物提取物进行了筛选，其中一株真菌产生的化合物 F03ZA-575 对来源于人的Caspase-3 酶具有明显的抑制活性，本文报道了该化合物的有关研究结果。

    1 材料和方法

    1.1 主要材料

    1.1.1 试剂 人源 Caspase-3 酶储液由华北制药集团新药研究开发中心利用基因工程技术在大肠杆菌 E.Coli 中表达并分离得到，–20 ℃ 冻存备用；底物 Ac-DEVD-AMC 购自美国 Sigma公司；其余化学试剂均为分析纯或色谱纯试剂。

    1.1.2 主要仪器 Victor21420 多功能测定仪为美国 PE公司产品；低温离心浓缩仪为德国 Christ公司产品；中压层析分离制备系统为瑞士 BUCHI公司产品；HPLC 高压液相分析和半制备系统为美国 Waters公司产品；500 MHz 核磁共振为美国Inova公司产品。

    1.1.3 实验菌种与提取物 放线菌株及真菌菌株由华北制药集团新药研究开发有限责任公司天然药物室微生物菌种库提供；筛选用放线菌及真菌发酵代谢产物样品由微生物代谢产物库提供。

    1.2 方法 ......